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选购四点ELISA试剂盒*技巧分析

2018-04-24 [1658]

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1. 检测办法
酶可以结合在一抗上,也可以结合在二抗上,还可以运用链霉亲和素符号的酶与亲和素符号的一抗结合。
此外ELISA的成果检测还包含放射性检测、荧光检测、化学发光或显色法检测等。
现在检测ELISA有许多途径,我们可以依据自己的偏好进行挑选。
一般ELISA检测的是酶促反响的可溶性产品,抗体上结合有相应的酶(例如一般运用的辣根过氧化物酶HRP),而反响体系中增加有相应的底物(如3,3-二氨基联苯胺DAB)。
这种酶促反响生成具有特征性的色彩,可以通过分光光度计进行检测,碱性磷酸酶AP也是一种常用酶。
2. 剖析抗体类型
单克隆抗体和多克隆抗体都可以用于ELISA试剂盒,实际上有时候二者结合作用更好。例如,关于双抗夹心法而言,用多抗进行捕获而单抗进行检测有时更有协助。
多抗可以确保捕获一切抗原,随后单抗再特异性检测拥有特定抗原表位的抗原。
3. 穿插发生的反响
假如抗体间发生冲突或穿插反响就会影响整个试验的特异性。其间抗体来历所带来的兼容性就是穿插反响的一个要素。
虽然现在购买源自动物的抗体越来越简单,我们仍有必要承认一下是否会发生穿插反响的问题。在用双抗夹心法进行ELISA检测时,检测用的二抗有必要特异性针对检测一抗,而不能与捕获抗体起反响。
假如检测用二抗与捕获抗体结合,试验特异性就会大打折扣。一般我们选用源自不同宿主的捕获抗体和检测一抗,来防止上述问题。
4、试剂盒的试验类型
ELISPOT有点像蛋白印迹Western blot,先在带膜的微孔板中培育细胞,然后在膜上检测细胞排泄的抗原构成斑驳。此外,我们还需求依据自身需求挑选96孔板或是384孔板进行ELISA试验。
还有兔、猪、猴、鸡、鸭、羊、植物等多种种属ELISA试剂盒,一切试剂盒通过充沛验证,确保有效且重复性佳。
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