处理ELISA试剂盒有哪些要求和方法
2019-06-14
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需要在实验前1小时将羊ELISA试剂盒从冰箱中取出,使各种试剂都康复到室温,以使成果更安稳。实验时,要使底物避光保存,用枪汲取液体时速度不能太快,避免发生气泡而使汲取量不准确,汲取液体时,要用量程和需要量接近的枪去吸,削减差错,要确保移液枪的准确性,差错不能超过百分之2。
1.血清:室温血液天然凝结10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细搜集上清,保存过程中如呈现沉积,应再次离心。
2.血浆:应根据羊ELISA试剂盒的标本的要求挑选EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分),保存过程中如有沉积构成,应该再次离心。
3.尿液:用无菌管搜集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细搜集上清,保存过程中如有沉积构成,应再次离心。
4.细胞培养上清:检测排泄性的成份时,用无菌管搜集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细搜集上清。检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。经过重复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细搜集上清。保存过程中如有沉积构成,应再次离心。
5.组织标本:切割标本后,称取分量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮敏捷冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS,用手艺或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细搜集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。
6.标本采集后尽早进行提取:提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能立刻进行实验,可将标本放于-20℃保存,但应避免重复冻融.
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