三大常用ELISA实验方法优势劣势
2019-07-26
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今日,我司技能专员为您解析ELISA试验三大常用方法的优势与下风,一同跟着研域(上海)小编来看看吧!总所周知,ELISA试剂盒法可分为多种类型测定,是一种广泛应用在测定液体样本中的蛋白、抗体、或激素的免疫分析技能。
一、直接法
将抗原直接固定在固相载体上,参与酶符号的一级抗体,即可测定抗原总量,此一级抗体的特异性非常重要。
优势:操作手续简略,因无须运用二抗可防止交互反应。
下风:试验中的一抗都得用酶符号,但不是每种抗体都适合做符号,费用相对前进。
二、ELISA试剂盒间接法
此测定方法与直接法相似,不同在于一级抗体没有酶符号,改用酶符号的二级抗体去辨识一级抗体来测定抗原量。
优势:二抗能够加强信号,并且有多种选择能做不相同的测定分析。不加酶符号的一级抗体则能保留它多的免疫反应性。
下风:交互反应发作的机率较高。
三、双抗体夹心法
被检查的抗原包被在两个抗体之间,其间一个抗体将抗原固定于固相载体上,即捕捉抗体。另一个则是检查抗体,此抗体可用酶符号后直接测定抗原的量;或不符号,再透过酶符号的二级抗体来测定抗原的量。这两种抗体有必要留心选择,才可防止交互反应或比赛相同的抗原结合部位。
优势:高活络、高专一性,抗原无须事前纯化。
下风:抗原一定得具有两个以上的抗体结合部位。
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