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ELISA实验操作试剂盒本身的影响

2019-11-22 [1253]

ELISA试剂盒在科研范畴运用尤为广泛,它以其特异性强和灵敏度高的特征被我们所亲睐,今日与我们说说ELISA试剂盒测定的进程。

ELISA试剂盒测定进程:
固相包被→加待测样品→温育→洗刷+加酶标物→温育→洗刷→加底物→温育一加中止液→比色→断定作用。
 
ELISA试剂盒操作较冗繁,在操作中应留神以下4个方面:
1. 在成批手工检测中,还应留神操作时差的影响。加样及混匀时刻的差异,使抗原抗体反响和酶促反响时刻不一致,对竞争法及定量检测影响很大,不留神可能会导致差错作用或定量禁绝。
 2. 洗刷是ELISA试剂盒操作进程中抉择试验胜败的一个要害进程。意图是除掉未结合的免疫反响物,中止抗原抗体反响,除掉标本中与反响无关的成分、游离的酶标物以及反响进程中吸附于固相载体上的非特异性物质。可用洗板机洗板或手工洗板,前者洗刷质量较好,各反响孔洗刷作用均一,批内、批间差异小,手工洗板应留神操控各孔洗刷作用,差异不宜太大。
3. 跟着病情的开展或由其他要素影响,某些抗体在机体内的含量发作大幅动摇,因此有必要对标本进行预处理。直接法测定中,标本恰当稀释还可下降非特异性反响。
4. 加样一般运用加液器,在ELISA试剂盒中一般有4次加样:加标本、加酶结合物、加底物和加中止液。加标本时有必要每份标本运用一支移液器吸嘴,避免交叉污染。加酶结合物、底物和中止液时则不需更换吸嘴。

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