生物素-亲和素系统（BAS）ELISA和免疫组化技术

生物素-亲和素系统（BAS）ELISA和免疫组化技术

20世纪70年代后期在免疫酶技术中利用生物素-亲和素系统（biotin-avidinsystem，BAS）标记抗体发展了又一种新型生物反应放大技术，即BAS-ELISA技术，它使用生物素-亲和素-过氧化物酶复合物作为指示剂，组成一新的生物放大系统进一步提高检测的敏感度。生物素（biotin）是广泛分布于动植物体内的一种生长因子，又称辅酶R或维生素H。亲和素（avidin）是卵白及某些微生物中的一种蛋白质，由4个亚单位组成。二者有高度亲和力，且均能偶联抗体、抗原和辣根过氧化物酶而不影响其生物学活性。
生物素-亲和素系统（BAS）ELISA和免疫组化技术
在生物素-亲和素系统中，借助所形成的亲和素-生物素-酶复合物，追踪生物素标记的抗原或抗体，通过酶催化底物显色，可检出相应的抗体或抗原。由于抗原或抗体分子可偶联多个生物素，且1个亲和素分子可结合4个生物素分子，组成新的生物放大系统，进一步提高检测的灵敏度。由于BAS亲和力高，所以具有高灵敏度、高特异性和稳定性等优点，在现代生物免疫学领域中已得到广泛应用，并显示出明显的*性。已报道有用于放射免疫、免疫荧光和免疫电镜等技术中，但应用更多的还是在酶免疫技术中。
生物素-亲和素系统（BAS）ELISA和免疫组化技术
BAS用于检测的基本方法可分为三大类：

*类是标记亲和素连接生物素化大分子反应体系，称BA法，或标记亲和素生物素法（LAB）；

第二类以亲和素两端分别连接生物素化大分子反应体系和标记生物素，称为BAB法，或桥联亲和素-生物素法（BRAB）；

第三类是将亲和素与酶标生物素共温形成亲和素-生物素-过氧化物酶复合物，再与生物素化的抗抗体接触时，将抗原-抗体反应体系与ABC标记体系连成一体，称为ABC法。

免疫组化技术（immunohitochemistry teehenique）是应用标记的特异性抗体与组织或细胞抗原发生反应，结合形态学观察，对抗原作定性、定量、定位检测。它把免疫反应的特异性、组织化学的可见性巧妙地结合起来，借助显微镜（包括荧光显微镜、电子显微镜）的显像和放大作用，在细胞水平、亚细胞水平检测各种抗原物质（如蛋白质、多肽、酶、激素、病原体以及受体等），并可在原位显示相应的基因和基因表达产物。免疫组化技术近年来得到迅速发展。20世纪50年代还于免疫荧光技术，之后逐渐发展建立起高度敏感，且更为实用的免疫酶技术。常用的技术包括酶免疫组化（辣根过氧化物酶标记）、免疫金组化（胶体金颗粒标记）、免疫电镜技术（铁蛋白、胶体金、过氧化物酶标记）等。