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免费代测人糖原磷酸化酶同工酶BBELISA检测试剂盒

2012-09-11 [1098]

人糖原磷酸化酶同工酶BBELISA检测试剂盒            

本试剂仅供研究使用  标本:血清或血浆

试验原理:
    GP-BB试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验(ELISA).已知GP-BB浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将GP-BB和生物素标记的抗体同时温育。洗涤后,加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤,去除未结合的酶结合物,然后加入底物A、B,和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中GP-BB的浓度呈比例关系。
  
安全性
避免直接接触终止液和底物A、B。一旦接触到这些液体,请尽快用水冲洗。
实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。
不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。

人糖原磷酸化酶同工酶BBELISA检测试剂盒 

操作注意事项
试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。
使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。
洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。
加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。

样品收集、处理及保存方法
血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后,1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。
细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。
保存------如果样品不立即使用,应将其分成小部分-70 ℃保存,避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒,检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

人糖原磷酸化酶同工酶BBELISA检测试剂盒 

操作步骤
使用前,将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫,以免加样时加入大量的气泡,产生加样上的误差。
根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定,能使用复孔的尽量做复孔。
加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板,轻轻振荡混匀,37℃温育1小时。
甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。
每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP,轻轻振荡混匀,37℃温育30分钟。
甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。
每孔加入底物A、B各50ul,轻轻振荡混匀,37℃温育10分钟。避免光照。
取出酶标板,迅速加入50ul终止液,加入终止液后应立即测定结果。
在450nm波长处测定各孔的OD值。

试剂盒性能
1. 灵敏度:zui小的检测浓度小于1号标准品。稀释度的线性。样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990。
2. 特异性:不与其它细胞因子反应。
3. 重复性:板内、板间变异系数均小于10%。

人糖原磷酸化酶同工酶BBELISA检测试剂盒 

结 果 判 断 与 分 析
1、仪器值:于波长450nm的酶标仪上读取各孔的OD值

2、以吸光度OD值为纵坐标(Y),相应的GP-BB标准品浓度为横坐标(X),做得相应的曲线,样品的GP-BB含量可根据其OD值由标准曲线换算出相应的浓度。

3、检测值范围:0-800pg/ml

4、敏感度: 1.0 pg/ml

HRG-alpha (Heregulin-alpha) 抗HRGα抗体 0.2ml
HSA(Human sermu albumin) 兔抗人血清白蛋白抗体 0.2ml
Avidin /Gold Avidin—胶体金5nm 0.5ml
NRG1/HRG-β(Heregulin-β) 抗HRGβ抗体 0.2ml
HSTF2/HSF2(Heat Shock Transcription Factor 2) 热休克转录因子2抗体 0.2ml
HSL/LIPE(hormone-sensitive lipase) 荷尔蒙敏感脂肪酶抗体 0.1ml
HSL/LIPE(hormone-sensitive lipase) 荷尔蒙敏感脂肪酶抗体 0.2ml
Hrasls3/HREV107(HRAS like suppressor 3) HRAS样抑制因子3抗体 0.2ml
HSP-20(Heat Shock Protein 20) 热休克蛋白-20抗体 0.1ml
Goat anti-Rabbit IgG/RBITC 罗丹明标记羊抗兔IgG 0.3ml
Goat anti-mouse IgG/RBITC 罗丹明标记羊抗小鼠IgG 0.3ml
HSP-20(Heat Shock Protein 20) 热休克蛋白-20抗体 0.2ml
HSP-27(Heat Shock Protein 27) 热休克蛋白-27抗体 0.1ml
HSP-27(Heat Shock Protein 27) 热休克蛋白-27抗体 0.2ml
HSP-60( Heat shock protein-60) 热休克蛋白-60抗体 0.1ml
HSP-60( Heat shock protein-60) 热休克蛋白-60抗体 0.2ml
HSP47( Heat shock protein-47) 热休克蛋白-47抗体 0.2ml
Rabbit anti-chicken IgG/Gold 金标记兔抗鸡IgG(10nm/15nm) 0.5ml
Rabbit anti-chicken IgG/Gold 金标记兔抗鸡IgG(10nm/15nm) 1ml
Rabbit anti-chicken IgM/Gold 金标记兔抗鸡IgM(10nm/15nm) 2ml
HSP-70 (Heat shock protein-70) 热休克蛋白-70抗体 0.1ml
HSP-70 (Heat shock protein-70) 热休克蛋白-70抗体 0.2ml
HSP75/TRAP-1(Heat Shock Protein 75) 热休克蛋白-75抗体 0.2ml
HSP-90α(Heat Shock Protein 90α ) 热休克蛋白90α抗体 0.1ml
HSP-90α(Heat Shock Protein 90α ) 热休克蛋白90α抗体 0.2ml
HSP-90β (heat sock protein-90β) 热休克蛋白-90β 抗体 0.1ml
Rabbit anti-dog IgG/Gold 金标记兔抗狗IgG (10nm/15nm) 2ml
HSP-90β (heat sock protein-90β) 热休克蛋白-90β 抗体 0.2ml
HSP-105 (heat sock protein-105) 热休克蛋白HSP105抗体 0.1ml
HSP-105 (heat sock protein-105) 热休克蛋白HSP105抗体 0.2ml
HSPG1/Syndecan-2(heparin sulphateprotoglycans 1) 多配体蛋白聚糖2/硫酸肝素糖蛋白1抗体 0.2ml
HtrA2/Omi(High temperature requirementprotein A 2) 丝氨酸蛋白酶/线粒体丝氨酸蛋白酶抗体 0.2ml
TRT(omerase catalytic subunit) 端粒酶抗体 0.1ml
Rabbit FITC/Gold 金标记兔抗荧光素(10nm/15nm) 2ml
TRT(omerase catalytic subunit) 端粒酶抗体 0.2ml
Human serum 兔抗人血清抗体 0.2ml
Hydroxyethyk starch/HES 130/0.4 羟乙基淀粉抗体 0.2ml
COX10 COX10抗体 0.1ml
COX10 COX10抗体 0.2ml
IAA(Indole-3-Acetic Acid) 吲哚-3-乙酸抗体/植物生长素抗体 0.1ml
IAA(Indole-3-Acetic Acid) 吲哚-3-乙酸抗体/植物生长素抗体 0.2ml
API5/AAC11(Apoptosis inhibitor 5) 凋亡抑制因子5抗体 0.2ml
Goat anti-human IgG/RBITC 罗丹明标记羊抗人IgG 0.3ml
Goat anti-Rat IgG/RBITC 罗丹明标记羊抗大鼠IgG 0.3ml

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