ELISA试剂盒的优点和影响因素?
ELISA试剂盒检测技术的优点近二十几年来,免疫学分析方法发展很快,特别是在使用标记了的抗原和抗体的分析技术以后,使原来许多经典的分析方法在敏感性和特异性方面都不能相比。继50年代的免疫荧光(IFA)和60年代的放射免疫(RIA)分析技术之后,在70年代初期又建立了用酶来标记抗原或抗体的分析技术。由于酶的生物催化作用,一个酶分子在数分钟内可以催化几十几百个底物分子发生反应,产生了放大作用,使得原来极其微乎其微的抗原或抗体在数分钟后就可被识别出来,这种技术被称为酶联免疫吸附试验法(Enzyme—Linked Immunosorbent Assay,ELISA),本法自70年代初期由VAN WEEMEN、SCHUARS.ENGVALL及PERLMARN等相继分别报道后,现已引起广泛重视。 ELISA试剂盒法是免疫诊断中的一项新技术,现已成功地应用于多种病原微生物所引起的传染病、寄生虫病及非传染病等方面的免疫诊断。也已应用于大分子抗原和小分子抗原的定量测定,根据已经使用的结果,认为ELISA法具有灵敏、特异、简单、快速、稳定及易于自动化操作等特点。不仅适用于临床标本的检查,而且由于一天之内可以检查几百甚至上千份标本,因此,也适合于血清流行病学调查。本法不仅可以用来测定抗体,而且也可用于测定体液中的循环抗原,所以也是一种早期诊断的良好方法。因此ELISA法在生物医学各领域的应用范围日益扩大,可概括四个方面: 1、免疫酶染色各种细胞内成份的定位。 2、研究抗酶抗体的合成。 3、显现微量的免疫沉淀反应。 4、定量检测体液中抗原或抗体成份。 酶联免疫吸附试验法以其灵敏度高(可达 ng 甚至pg 水平),特异性好等优点,在生命科学各领域得到广泛应用,它已迈出医药、临床领域,步入农业、渔业、畜牧业和食品加工业 。
下面将 ELISA试剂盒 法与免疫荧光(IFA)和放射免疫(RIA)的各自优缺点作一简要的比较三种方法的优缺点比较:方法种类 ELISA RIA IFA敏感性 高 高 低特异性 取决于抗原制备 取决于抗原制备 较高重演性 尚满意 尚满意 尚满意结果判断 客观 客观 有主观因素抗原制备 较容易或复杂 较容易或复杂 较容易结合物制备 正在标准化 已标准化 已标准化在野外条件下用于大量人群标本的普查 可以 困难 尚可以分析自动化 可以 可以 困难主要设备 酶标比色计 粒子计数器 荧光显微镜试验成本 低 高 较高试剂半衰期 长 短 长对人的危害性 无或很少 有 无或很少主要检测对象 抗体或抗原 抗原 抗体或抗原应用范围 小的诊断实验室 大的中心实验室 小的诊断实验室。